高保真犬肝实质细胞模型：武云克隆犬原代肝细胞（Hepatocyte）科研应用全解析

肝脏是机体物质代谢、药物生物转化、毒素解毒的核心器官，肝实质细胞（肝细胞）承载肝脏 90% 以上生理功能，是药代毒理、肝病机制、兽用新药研发不可替代的体外研究工具。比格犬作为药理毒理学标准实验动物，其原代肝细胞因代谢通路、药物响应与犬类临床高度匹配，成为兽药、宠物肝病研究的核心细胞模型。武汉云克隆依托标准化原代细胞制备平台推出犬肝实质细胞（Primary Canine Hepatocyte, Hep），以稳定高活率、完整肝脏功能、严格质控体系，为国内科研工作者提供标准化犬源肝细胞体外实验方案武汉云克隆动物有限公司。

一、产品基础参数：标准化 SPF 级比格犬源细胞
武汉云克隆犬肝实质细胞严格选用1–2 周龄 SPF 级 Beagle 比格犬健康肝脏组织分离制备，无病毒、微生物污染，产品基础规格清晰可控：
细胞特性：纯肝实质细胞，悬浮型原代细胞，高度分化不具备无限增殖能力；台盼蓝染色检测细胞活率＞85%，细胞纯度＞95%，无肝星状细胞、胆管上皮细胞等杂细胞污染

图.云克隆犬肝实质细胞图

二、核心制备工艺：改良两步胶原酶灌流法，最大保留肝细胞原生功能
犬肝细胞对消化、分离操作极度敏感，传统组织剪碎消化法易造成细胞破损、代谢酶大量丢失。武汉云克隆技术团队优化成熟两步胶原酶门静脉灌流工艺，是细胞高活性、功能完整的核心保障：

预灌流去钙洗脱：无钙 EDTA 缓冲液灌注肝脏，冲净肝内血液，解离细胞间钙粘蛋白，降低机械消化损伤；
胶原酶温和解离：含钙胶原酶缓冲液二次灌流，精准降解肝组织间质纤维，完整释放多角形肝实质细胞；
梯度纯化除杂：多级细胞筛过滤 + 低速差速离心，清除血细胞、结缔组织碎片、非实质细胞，获得高纯度肝细胞悬液；
即时冻存 / 新鲜分装：分离完成后快速重悬于专用肝细胞冻存液，程序降温冻存，最大程度保留 I/II 相药物代谢酶（CYP450 家族）、白蛋白分泌、尿素合成、胆汁转运等核心肝脏生理功能。

相较于市面普通犬肝细胞产品，云克隆这套成熟工艺解决了行业普遍痛点：细胞活率低、体外快速去分化、CYP 酶活性大幅衰减、杂细胞干扰实验数据等问题，体外短期培养仍可稳定维持犬肝脏特有代谢表型。

三、云克隆犬肝实质细胞核心优势
1. 实验动物资质合规，样本溯源完整
依托自有具备正规生产、 有《实验动物质量合格证》的比格犬，按照《实验动物使用许可证》的要求，对所有供体动物检疫记录、周龄、健康档案完整可追溯。

图.云克隆大动物使用许可证

2. 功能保真，适配犬类特异性研究
永生化肝细胞系（如 HepG2）存在代谢酶缺失、物种表型失真缺陷，而云克隆原代犬肝细胞直接取自活体犬肝脏，完整保留犬特有药物代谢通路、毒素应答机制，完美规避人源、啮齿类肝细胞与犬体内生理差异带来的实验偏差，是宠物肝病、兽药研发最优体外模型。

3. 全流程标准化质控，批次稳定性强
每批次细胞出具完整 COA 质检报告，包含细胞活率、纯度、微生物检测、细胞形态镜检四项核心指标；统一标准化分离、冻存、运输流程，批次间差异极小，保障多次平行实验数据重复性。

四、主流科研应用场景
（一）兽药 ADME 与肝毒性评价
药物代谢动力学研究：检测兽药、宠物保健品在犬肝细胞内的代谢途径、代谢产物生成，定量分析 CYP450 酶介导的 I 相、II 相代谢反应，评估药物清除速率；
药物性肝损伤（DILI）筛选：体外模拟药物诱导肝细胞坏死、脂肪变性、胆汁淤积，提前筛选高肝毒性候选兽药，降低动物体内实验失败风险；
药物相互作用评估：两种及以上宠物联合用药时，检测代谢酶诱导 / 抑制效应，预测临床联用肝损伤风险。
（二）宠物肝脏疾病机制基础研究
犬脂肪肝、药物性肝炎、中毒性肝损伤细胞模型构建，探究脂代谢紊乱、氧化应激、细胞凋亡通路；
犬病毒性肝炎、肝纤维化体外细胞水平机制探究，筛选保肝活性天然产物、中药提取物；
肝脏转运蛋白（NTCP、OATP）表达与功能研究，解析胆红素、药物、毒素肝胆排泄机制。
（三）分子与细胞生物学基础研究
肝细胞基因表达调控、白蛋白、尿素合成功能检测；
慢病毒、AAV 介导肝细胞基因转染、基因编辑功能验证；
肝细胞 3D 球体、类器官、肝芯片体外模型构建，搭建长期功能性体外肝模型。
（四）毒理学与环境污染物评估
检测饲料毒素、环境重金属、驱虫药、消毒剂对犬肝细胞的损伤效应，为宠物安全养殖、兽药安全剂量制定提供体外数据支撑。
无论是高校实验室基础肝病机制研究，还是药企 CRO 兽药筛选、临床前毒理评价，该款犬肝实质细胞均可提供贴近犬体内真实生理状态的体外研究模型，大幅降低动物实验成本，提升实验数据可靠性，是国内犬肝脏体外研究的优选标准化原代细胞产品。